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1856年8月15日，杨秀清最后一次用上帝的名义发布圣旨：秦日纲帮妖，陈承瑢帮妖，放烧朕城，未有救。这种沮丧和愤怒，是因秦和陈大败而归感概所发，还是杨感到厄运降至，自己又无能为力的无奈，已无法得知。
定都天京后，天王洪秀全作为精神领袖，深居天王府；东王杨秀清治理政务，军事部署均由他一手掌控；北王韦昌辉负责协调天京周围防务；翼王石达开常在前线，亲自指挥战事。
日益高傲
杨秀清在1847年，首次借“神灵附体”宣读上帝旨意，将“拜上帝教”从危难中解救出来后，便开始跻身到权力中心，个人又凭借出色的军事才能，逐渐超越了天王洪秀全，成为了太平军中实际上最有权力的人。
但与之相对应的则是他个人气焰与嚣张与日剧增。只要在天父下凡宣谕的时候，他必是坐六人抬大轿，身边侍从分列两旁，另有“金鼓”，“金锣”和“圣枪礼炮”开路齐响致礼。人人看见都要跪倒喊接“东王驾到”，即使那时冬天寒风刺骨，雨雪纷飞，地面满是冰霜。甚至连洪秀全都得出宫门迎接东王，在天王府门口跪接圣旨，有时杨秀清还不打算前往天王府宣谕，洪还得移驾亲赴东王府跪接。
在政事上，洪秀全已然因“天父驾到”受了不少杨的气；在个人生活方面，杨秀清依旧不依不饶；比如指责洪不孝顺，没有派宫女照顾好母亲；责怪洪冷落发妻，让妻子自己动手做粗活；甚至贬低洪秀全的儿子洪天贵，说他不如自己的儿子有孝心。
对于洪秀全的心腹大将，他也要一并羞辱：北王韦昌辉不断被他叫去聆听上帝训诫，不分昼夜时候，若是韦昌辉胆敢拖延，必是当众挨鞭子。秦日纲也遭受类似的羞辱，他甚至帮杨抬轿子进宫殿。甚至他还想宣翼王进殿听旨，只不过石达开常年征战在外，无法随意返回天京，将在外军令有所不从。
1855年，杨秀清卧病在床，在他身边诚心照顾他的官员，稍有做错，或是让他听到不当言论，就会被杨当众处决。那些被杨判为“大违天规”的官员，直接用膏油将他们活活烧死，称之为“点天灯”。一时之间人人惧东王，传说连小孩经过东王府都会嚎啕大哭。
杨秀清虽然战功显赫，但手下能用，叫得出名字，或是能独挡一面的人物实在寥寥无几，而在他心高气傲之后，更是连最后与他相熟的将领们都心生芥蒂了，加上他又四面竖敌，眼中没有其他封王，这也导致洪秀全围攻东王府时他身边竟无人替他抵抗。
贪得无厌
1856年8月权势煊赫之时的杨秀清，不再甘心屈居洪秀全之下，于是在太平军攻破江南大营后，以大功为由，再一次假托天父传旨，向洪秀全逼封“万岁”（现也有一说无逼封此事）。洪秀全是天王，是万岁，而杨秀清也要万岁，无疑就是要与洪秀全平起平坐，这是威胁到了谁是大佬的事啊。
于是杨秀清的逼封，让洪秀全更为恼怒。洪秀全虽然长期放权，在天王府内享乐，但大量的眼线安插在天京城内，对杨秀清结党自成集团，甚至霸占天王妃子等事也是早已知晓，那时的杨秀清已然是心腹大患。洪秀全为共主，是天王，而杨秀清搬弄大家心知肚明但不敢戳穿的旁门左术，成为天王之父，无疑是找到了一把制约洪秀全的威胁性工具，更是早早地让洪秀全满怀忌恨。
洪秀全不甘心在权力让渡给杨秀清的同时，又被他在名义上弄一个并肩王，这一次就是一种冠冕堂皇的僭越，那就是造反了。故而，洪秀全决意对杨秀清动手，正逢陈承瑢告发杨秀清意欲篡位，只是给了洪秀全、韦昌辉清剿杨秀清的一个借口。1856年9月2日，韦昌辉带兵三千秘密入城包围东王府，一夜之间，东王府全府及杨秀清家属，部将几被砍杀。
杨秀清之死，死于对权力欲望无穷而无底线的追求，史学家罗尔纲说：“杨秀清妄逞个人威风，要夺取皇帝宝座，乃天京事变的祸首。”
但故事不仅如此，在攻破东王府后，韦昌辉由以抓捕“东王党”为由，在天京城内屠戮两万余人。翼王石达开听闻，立马回京与韦昌辉相见，指责其滥杀，但最终不欢而散，并当夜匆忙缒城逃出城外。北王韦昌辉捉拿翼王未果，尽杀其天京城内家属及王府部属。翼王石达开于是起兵讨伐北王，求天王杀北王以谢天下。翼王常年领兵，军中威望很高，因此此时在天京以外的太平军大多支持翼王，北王在势急下攻打天王府，欲胁天王以令天下，但被天王洪秀全部众和东王余党联手围困，北王韦昌辉于11月2日兵败被杀。
